1、實(shí)驗(yàn)環(huán)境
良好的實(shí)驗(yàn)環(huán)境是石門(mén)縣植物組織培養(yǎng)室規(guī)劃成功的關(guān)鍵因素之一。植物組織培養(yǎng)的全過(guò)程需要在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行。從缺外植體修剪的實(shí)生苗培養(yǎng)到后期的無(wú)苗培養(yǎng)都與環(huán)境密不可分。專業(yè)和潔凈的植物是植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)成功不可或缺的條件,它可以大大降低組織培養(yǎng)操作和無(wú)菌種子培養(yǎng)中的污染幾率。
2、實(shí)驗(yàn)設(shè)備和耗材
1.超凈工作臺(tái):是一種通用性很強(qiáng)的空氣凈化設(shè)備,提供局部高潔凈度的工作環(huán)境。它是植物組織培養(yǎng)中的核心儀器,可以提供高達(dá)100的清潔度。沒(méi)有超凈工作臺(tái)提供的無(wú)菌環(huán)境,植物組織培養(yǎng)的成功率幾乎為零。在常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下,無(wú)法進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。即使實(shí)驗(yàn)操作完成,培養(yǎng)的無(wú)菌苗也會(huì)受到外界微生物的污染。
植物組織培養(yǎng)室
光照培養(yǎng)箱
陽(yáng)光型人工氣候室
光照培養(yǎng)室
操作期間,各生產(chǎn)房間要關(guān)閉門(mén)窗,尤其是接種室和培養(yǎng)室;接種時(shí),接種人員不得隨意進(jìn)出接種室,非接種人員不得進(jìn)入;實(shí)驗(yàn)人員非工作需要不得進(jìn)出接種室和培養(yǎng)室,防止雜菌侵入;操作過(guò)程中產(chǎn)生的垃圾要及時(shí)清理,尤其是接種室;進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室人員要樹(shù)立安全意識(shí),遵守各項(xiàng)安全管理制度
1、光周期:光培室廠商在植物組織培養(yǎng)中,光周期對(duì)植物形態(tài)建成的影響因植物種類而異。 許多植物對(duì)光周期敏感,通常選擇一定的光周期進(jìn)行組織培養(yǎng)。*常
用的光周期是16小時(shí)光培養(yǎng)、8小時(shí)黑暗培養(yǎng)、12小時(shí)光培養(yǎng)和12小時(shí)黑暗培養(yǎng)。
2、光照:光是組織培養(yǎng)的重要外部條件之一,對(duì)外部植物的生長(zhǎng)和分化有很大的影響。光對(duì)組織培養(yǎng)的影響主要體現(xiàn)在光周期、光強(qiáng)度和光質(zhì)三個(gè)方面。
3、光強(qiáng):光強(qiáng)對(duì)培養(yǎng)材料的增殖和器官的分化有重要影響,特別是對(duì)外植體細(xì)胞的初始分裂。
2.高壓蒸汽滅菌鍋:是植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的另一個(gè)核心儀器,對(duì)植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的培養(yǎng)基和接種儀器進(jìn)行滅菌,使其無(wú)菌。
3.微量可調(diào)裝置和吸頭:測(cè)量微量液體的實(shí)驗(yàn)工具,用于測(cè)量微量和微量的激素母液,調(diào)節(jié)各種培養(yǎng)基中所需的激素濃度。微量可調(diào)移液器在其他實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用率也較高,而有些實(shí)驗(yàn)要求使用的儀器是無(wú)菌的,即能在高溫高壓下滅菌和紫外線照射,這是傳統(tǒng)儀器無(wú)法完成的。
4.感應(yīng)烹飪或微波爐:介質(zhì)用于加熱溶解工具。小組實(shí)驗(yàn)的少量培養(yǎng)基可以用燒杯和微波爐加熱。大班實(shí)驗(yàn)用感應(yīng)烹飪加熱大量介質(zhì)更方便。
高照度人工氣候室
組培室作為一個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,一般應(yīng)該位于較為干凈、通風(fēng)良好、無(wú)塵、無(wú)霉、微生物污染少的地方。組培室一般要求配有消毒裝置和滅菌設(shè)備,以確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的無(wú)菌狀態(tài)。同時(shí)還需要配備適當(dāng)?shù)倪^(guò)濾系統(tǒng)和空調(diào)設(shè)備控制室溫、濕度和空氣潔凈度等參數(shù)。組培室還要設(shè)置在室內(nèi)地板上,以便易于清潔和消毒。
5.酒精燃燒器:建議使用不銹鋼酒精燃燒器作為手術(shù)刀、解剖剪、鑷子火焰滅菌的工具,有效防止損傷。
6.解剖剪刀:修剪外植體的實(shí)驗(yàn)工具。
7.解剖刀:切割外植體的實(shí)驗(yàn)工具。
8.鑷子:用來(lái)夾住外植體進(jìn)行修剪和接種的工具。無(wú)菌技術(shù)時(shí),嚴(yán)禁雙手接觸外植體,操作需用鑷子。
3、專業(yè)實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)
據(jù)石門(mén)縣植物組織培養(yǎng)室規(guī)劃生產(chǎn)廠家介紹,植物組織培養(yǎng)的整個(gè)過(guò)程是一個(gè)漫長(zhǎng)而復(fù)雜的過(guò)程,少則三五個(gè)月,多則一至兩年。整個(gè)過(guò)程需要由專門(mén)的實(shí)驗(yàn)人員負(fù)責(zé)管理。過(guò)程中需要隨時(shí)注意分化轉(zhuǎn)化、生根培養(yǎng)、煉苗、污染苗的清理?!吧B(yǎng)”的組織培養(yǎng)方式必然導(dǎo)*實(shí)驗(yàn)的失敗。