中山組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基成分
分植物人工氣候室
1.到目前為止,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基有幾十種。綜上所述,任何培養(yǎng)基都有以下成分:無(wú)機(jī)鹽(大量元素、微量元素)、有機(jī)化合物(蔗糖、維生素、氨基酸、核酸等水解化合物)、鐵鹽螯合劑、植物激素。
植物激素的純度對(duì)組織培養(yǎng)的成功至關(guān)重要。接種外植體的分化速度(長(zhǎng)芽)和方向(長(zhǎng)根)取決于添加的激素的類型、數(shù)量和比例。簡(jiǎn)而言之,主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的添加量以及兩者的比例。一般的生長(zhǎng)素類包括吲哚乙酸、吲哚丁酸和萘乙酸;細(xì)胞分裂素包括激動(dòng)素、芐氨基嘌呤和二甲基丙烯氨基嘌呤。
植物組織培養(yǎng)室
一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)包括洗滌室、配置室、接種室、培養(yǎng)室、觀察室(冷卻室)、滅菌室、洗苗室等。在實(shí)際中可結(jié)合可行條件,合并一部分。
組培室主要設(shè)備:
植物組織培養(yǎng)是在嚴(yán)格無(wú)菌的條件下進(jìn)行的,因此需要配備超凈工作臺(tái)、電子分析天平、精密移
液器、高壓滅菌鍋、體視顯微鏡、光照培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、空調(diào)、冰箱等設(shè)備。
光照培養(yǎng)室
光照培養(yǎng)箱
中山組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基中的糖主要是蔗糖,在少數(shù)情況下使用葡萄糖。蔗糖可用于大規(guī)模生產(chǎn)。培養(yǎng)基中糖的作用是提供碳源,同時(shí)維持滲透平衡。瓊脂是固體培養(yǎng)基的一種成分,起固化劑支持物的作用。瓊脂在培養(yǎng)基的成本消耗中占有相當(dāng)大的比例,培養(yǎng)基中瓊脂的添加量一般為4-7g。
2.在中山組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)生產(chǎn)中,培養(yǎng)基的制備需要相當(dāng)數(shù)量的母液,需要分批連續(xù)制備。為了簡(jiǎn)化制備過(guò)程和提高工作效率,通常將各種所需藥物制備成高濃度溶液并儲(chǔ)存。配制培養(yǎng)基時(shí),根據(jù)所需濃度稀釋一定量;我們將這些高濃度溶液稱為儲(chǔ)備溶液,通常稱為母液。
配制母液時(shí),先將所有藥物分成幾組,每組藥物制成一種母液。分組的原則是同一組藥物混合溶解時(shí),不會(huì)發(fā)生質(zhì)變或沉淀。藥物一般分為五類:常量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)化合物和植物激素。植物激素的母液有幾種,每種激素先制成1mg/ml的溶液。