什么是植物組織?
植物的組織培養(yǎng)是根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性這個(gè)理論,近幾十年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)無(wú)性繁殖的新技術(shù)。植物的組織培養(yǎng)廣義又叫離體培養(yǎng),指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞,原生質(zhì)體等,通過(guò)無(wú)菌操作,在無(wú)菌條件下接種在含有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。狹義是指組培指用植物各部分組織,如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進(jìn)行培養(yǎng)獲得再生植株,也指在培養(yǎng)過(guò)程中從各器官上產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng),愈傷組織再經(jīng)過(guò)再分化形成再生植物。
植物組織培養(yǎng)過(guò)程中包括以下幾個(gè)步驟:
(1)準(zhǔn)備階段
查閱相關(guān)文獻(xiàn),根據(jù)已成功培養(yǎng)的相近植物資料,結(jié)合實(shí)際制訂出切實(shí)可行的培養(yǎng)方案。然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案配制適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)消毒劑以及不同培養(yǎng)階段所需的培養(yǎng)基,并經(jīng)高壓滅菌或過(guò)濾除菌后備用。
(2)外植體選擇與消毒
選擇合適的部位作為外植體,采回后經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,然后進(jìn)行消毒處理。將消毒后的外植體在無(wú)菌條件下切割成一定大小的小塊,或剝離出莖尖,挑出花藥,接種到初代培養(yǎng)基上。
(3)初代培養(yǎng)
接種后的材料置于培養(yǎng)室或光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),促使外植體中已分化的細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,或頂芽、腋芽直接萌發(fā)形成芽。然后將愈傷組織轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基分化成不同的器官原基或形成胚狀體,**發(fā)育形成再生植株。
(4)繼代培養(yǎng)
分化形成的芽、原球莖數(shù)量有限,采用適當(dāng)?shù)睦^代培養(yǎng)基經(jīng)多次切割轉(zhuǎn)接。當(dāng)芽苗繁殖到一定數(shù)量后,再將一部分用于壯苗生根,另一部分保存或繼續(xù)擴(kuò)繁。進(jìn)行脫毒苗培養(yǎng)的需提前進(jìn)行病毒檢測(cè)。
(5)生根培養(yǎng)
剛形成的芽苗往往比較弱小,多數(shù)無(wú)根,此時(shí)可降低細(xì)胞分裂素濃度或不加,提高生長(zhǎng)素濃度,促進(jìn)小苗生根,提高其健壯度。
(6)煉苗移栽
選擇生長(zhǎng)健壯的生根苗進(jìn)行室外煉苗,待苗適應(yīng)外部環(huán)境后,再移栽到疏松透氣的基質(zhì)中,注意保溫、保濕、遮蔭,防止病蟲(chóng)危害。當(dāng)組培苗完全成活并生長(zhǎng)一定大小后,即可移向大田用于生產(chǎn)。